非接觸破碎儀實(shí)驗(yàn)時(shí)遇到的常見(jiàn)問(wèn)題說(shuō)明

　　探頭振動(dòng)形成數(shù)百萬(wàn)個(gè)微氣泡(空穴)，微氣泡不斷膨脹并發(fā)生劇烈爆破。這種稱為空穴現(xiàn)象的現(xiàn)象可以在探頭尖部產(chǎn)生強(qiáng)力的剪切作用，從而引起液體中分子強(qiáng)烈振動(dòng)。

　　非接觸破碎儀超聲探頭由鈦合金制成，可以作為一個(gè)機(jī)械變量器來(lái)提高由轉(zhuǎn)換器所產(chǎn)生的振動(dòng)的振幅。探頭直徑越大，可以處理的樣品量則越多，但是超聲波強(qiáng)度會(huì)相應(yīng)降低。當(dāng)處理體積更多，粘度更大的樣品，或在高壓條件下工作時(shí)，需要使用更大功率的破碎儀。當(dāng)處理含有機(jī)溶劑的樣品或低表面張力的液體時(shí)，通常使用一體式探頭，不建議使用探頭尖可更換的探頭。所有探頭均可進(jìn)行高溫高壓滅菌。

　　非接觸破碎儀試驗(yàn)時(shí)的常見(jiàn)疑問(wèn)解析：

　　鏈霉菌超聲破碎的方法條件是什么？

　　一般前處理就是配置成一定濃度的菌懸液，使用非接觸破碎儀進(jìn)行超聲破碎。這時(shí)采用的具體條件如下：

　　1.取細(xì)菌的24 h培養(yǎng)液于5 000 r/min下離心5 min收集菌體；

　　2.用pH 7．5的Na2HPO-NaH2PO緩沖液洗滌3次，再用該緩沖液將菌體配成1：3的菌懸液．置于40 mL大塑料試管內(nèi)；

　　3.將大塑料試管置于冰浴中，采用超聲波破碎(功率200 W，1/2”探頭，破碎30 s，間歇30 s)；

　　4.破碎液于12 000 r/min下高速冷凍離心30 min，收集細(xì)胞碎片和上清液，超聲破菌流程與上述基本一致，就是洗滌菌體也可以用預(yù)冷的生理鹽水或pH8的Tris－HCl，洗滌一次就可以。另外超聲劑量隨樣品量、菌體改變比較大，功率可以到400－600w，超5s，停5s，冰浴，要加終濃度1 mM的PMSF。為確定合適的超聲強(qiáng)度和次數(shù)，有必要隨時(shí)鏡檢觀察菌體是否*破碎。放線菌屬于原核生物系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)上的(G＋C)摩爾百分含量(mol％)高的革蘭氏陽(yáng)性菌分枝類群。在做大腸桿菌超聲時(shí)，采用的是400W非接觸破碎儀，超5停5的方法效果不錯(cuò)，但是用在鏈霉菌上似乎沒(méi)什么效果，這是因?yàn)榇竽c桿菌式屬于革蘭氏陰性菌的。